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ubiquigent 60-0001-010說明書

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ubiquigent 60-0001-010說明書 

  • Ubiquitin [untagged]泛素[未標記]
    60-0001-010
    10 mg
    £250
  • 物種
    牛的
  • 來源
    紅細胞
  • 數(shù)量
    10毫克
  • 貯存
    4°攝氏度
  • 公式
    粉末(從溶解在水中的蛋白質(zhì)凍干);根據(jù)需要補水
  • 分子量
    ?8.6 kDa
  • 穩(wěn)定
    在4°C凍干1年;-20°C復水6個月;根據(jù)需要等分
  • 蛋白質(zhì)序列
    登記號:P62990.1。有關完整蛋白質(zhì)序列的信息,請下載分析證書pdf。
  • 質(zhì)量檢查;活動
    E2-泛素硫酯負載試驗:泛素的活性通過經(jīng)由轉(zhuǎn)硫基化反應將泛素加載到UBE2N E2酶的活性半胱氨酸上來驗證。在T 0和T 10分鐘這兩個時間點比較了在30°C ATP存在下泛素,UBE1和UBE2N酶的孵育。確認了遍在蛋白/ UBE2N硫酯鍵對還原劑DTT的敏感性。
  • 泛素是高度保守的蛋白質(zhì),在泛素化途徑中起關鍵作用。泛素僅在真核生物中發(fā)現(xiàn),遍歷整個序列均顯示出很強的序列保守性(Wilkinson,1995)。遍在蛋白存在于所有細胞類型中,以游離形式存在,或通過其C端甘氨酸和ε之間的共價鍵與蛋白綴合-賴氨酸殘基的氨基;被稱為泛素化或泛素化的過程。泛素化是一種受多酶級聯(lián)影響的重要細胞過程,該級聯(lián)涉及三類酶,稱為激活酶(E1s),結(jié)合酶(E2s)和蛋白質(zhì)連接酶(E3s)。E1以ATP依賴的方式激活泛素,導致在泛素的羧基末端和E1酶之間形成硫酯鍵。然后在泛素的羧基末端和E2以及(在某些情況下)E3酶的特定半胱氨酸之間產(chǎn)生順序的,瞬態(tài)的硫酯鍵(Bonifacino和Weissman,1998)。終,在泛素的甘氨酸羧基末端和ε之間形成一個異肽鍵-靶蛋白上的賴氨酸殘基的氨基(單-泛素化)或另一泛素上的賴氨酸殘基的氨基,導致泛素鏈的產(chǎn)生(多泛素化),其可以是Lys-6,Lys-11,Lys-27,Lys- 29,Lys-33,Lys-48或Lys-63連鎖(Komander,2009)。泛素鏈本質(zhì)上也可以是線性的,是通過一個泛素部分的活化甘氨酸殘基與α綴合形成的-另一個泛素N末端的N-氨基。特定的泛素鏈類型采用不同的構(gòu)象,這在其功能方面可能很重要。盡管已經(jīng)確定了某些鏈類型的某些功能,但其中許多結(jié)構(gòu)的作用仍有待充分闡明(Komander,2009)。關于Lys-48和Lys-63鏈的類型,已經(jīng)確定了一些關鍵作用:Lys-48連接鏈將底物導向26S蛋白酶體介導的降解(Verma等,2004),而Lys-63連接鏈的作用包括的NF-的激活κB途徑和DNA修復途徑的步驟的介導(DiFiglia等,1997; Rahighi等,2009; Tokunaga等,2009)。有趣的是,構(gòu)成多種類型的病理性包涵體的蛋白質(zhì)可能被多泛素化,但是它們可能具有抗降解性。例如,多泛素化亨廷頓蛋白聚集在亨廷頓氏病患者的紋狀體和皮層的神經(jīng)元核內(nèi)包涵體(NII)和營養(yǎng)不良的神經(jīng)突上(DiFiglia 等,1997)。

    參考:

    Bonifacino JS,Weissman AM(1998)泛素和分泌和內(nèi)吞途徑中蛋白質(zhì)命運的控制。Annu Rev Cell Dev Biol 14,19-57。

    DiFiglia M,Sapp E,Chase KO,Davies SW,Bates GP,Vonsattel JP,Aronin N(1997)腦中神經(jīng)元核內(nèi)包涵體和營養(yǎng)不良性神經(jīng)突的亨廷頓蛋白聚集。科學277,1990-3。

    Komander D(2009)蛋白質(zhì)泛素化的新興復雜性。Biochem Soc Trans 37,937-53。

    Rahighi S,池田F等人。(2009)NEMO對線性泛素鏈的特異性識別對于NF-κB激活很重要。細胞136,1098-109。

    Tokunaga F,Sakata S等人。(2009)NEMO的線性多泛素化在NF-κB激活中的參與。Nat Cell Biol 11,123-32。

    Verma R,Oania R,Graumann J,Deshaies RJ(2004)泛素鏈受體定義了泛素-蛋白酶體系統(tǒng)中的底物選擇性層。電池118,第99-110頁。

    Wilkinson KD(1995)泛素化在蛋白水解和細胞調(diào)節(jié)中的作用。Ann Nu Rev Nutr 15,161-89。

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