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包被的ELISA板的穩定性對您是否重要?
Liquid Plate Sealer®可以保護固相蛋白的天然構象。
l 長期穩定
l 價格低廉
l 德國生產
抗體或抗原被固定在板上后,Liquid Plate Sealer®給您的板子覆蓋上一層均一的涂層,使其能夠穩定的被封閉起來。Liquid Plate Sealer®可溶性*,不會影響后續的實驗。Liquid Plate Sealer®可以保持固定在固相上的蛋白的活性。
另外,它可以減少由運輸和儲存條件改變帶來的變異性,因此得到的實驗結果重復性會更好。它很便于使用,可應用于大部分的實驗操作中,只要替換原有試劑即可。
不含血清蛋白(如BSA),所以不會有血清蛋白造成實驗干擾的可能性。用Liquid Plate Sealer®處理過的板子可以在干燥后儲存很長時間,潮濕環境中儲存時間較短。
包被板的儲存時間取決于抗體,板本身和包被流程。所以需要分別這些因素對貯存時間的影響。
穩定性試驗
如圖表所示,用單抗測試Liquid Plate Sealer®的穩定性效果。包被過的微量板分別用Liquid Plate Sealer®和其他廠家的穩定劑穩定。抗體包被的微量板干燥后置于45℃。比較放置后的抗體活性與新鮮包被的抗體活性,45℃下用Liquid Plate Sealer®孵育66天后,單抗的活性仍然大于85%。
即用
不含血清蛋白(如BSA)
防腐劑:含有0.1%的ProClin 300。
產品規格: 50ml 產品編號 160 050
125ml 產品編號 160 125
500ml 產品編號 160 500
Liquid Plate Sealer®也可為試劑盒廠商提供更大規格的包裝。
其他測試:
圖2: 只用BSA(紅線)和用BSA封閉后加Liquid Plate Sealer®穩定(藍線)的ELISA標準曲線。zui初標準曲線的起點是一樣的,ELISA保存在37℃條件下,沒有穩定劑的實驗靈敏性下降地很快。在應激實驗84天后,用穩定劑處理過的ELISA并沒有表現出靈敏性下降。
圖3: 保存在37℃84天和一開始的ELISA結合活性。這幅圖表示的是在抗體為40ng/ml濃度下的ELISA測試結果,圖中可以很清楚的看出Liquid Plate Sealer®保護抗體結合活性的能力,同時也可以看出Liquid Plate Sealer®可以與任何不同的封閉劑組合。
注意事項:
Liquid Plate Sealer®是即用型的。Liquid Plate Sealer®可以加入到包被好的微孔板、聚苯乙烯微珠或者載玻片上。Liquid Plate Sealer®給您的板子密封上一層均一的涂層,并且Liquid Plate Sealer®可溶性*,不會影響后續的實驗,該保護性層可以長時間穩定保存包被的分子。
Liquid Plate Sealer®可以在板子包被和洗滌后直接使用。Liquid Plate Sealer®可以一步完成封閉,密封,穩定的過程。對于大多數實驗來說,不需要再增加封閉的步驟。只有在有強背景干擾的情況下,我們推薦在密封前進行The Blocking Solution (訂購編號110 050,110 125,110 500)封閉的操作。
微孔板或者固相表面與Liquid Plate Sealer®共孵育,然后干燥。這樣可以延長包被分子的保質期,在陰涼干燥的環境中一般可以保存1-3年。
實驗緩沖液或者樣本可以直接加到Liquid Plate Sealer®密封后的板子(固相)上,進行后續的實驗,不需要增加洗滌步驟。
說明書上關于密封后板子的保質期只是一個保守值。有些實驗報道過更長的保質期,但是對于另一些實驗來說不一定是適用的。所以請客戶根據自己的實驗測試密封板的保質期。
使用方法:
微孔板的一般包被和封閉步驟。
封閉之后:用200-300μl PBS或者不含去污劑的洗滌緩沖液(例如:CANDOR 產品編號 141 500 或者146 500)洗板3次。
每孔加入200μl Liquid Plate Sealer®,在20 – 30 °C溫度范圍內孵育15-90分鐘。保證每孔加入的體積比包被液體積50ul或者至少與包被液體積相同,從而保證Liquid Plate Sealer®可以*覆蓋包被表面。
小心吸掉Liquid Plate Sealer®。可將板子在吸水紙上拍干,37 – 45°C孵育板子直到干燥。孵育的時間一般在60-120分鐘之間,具體時間取決于溫度,恒溫箱類型,恒溫箱中板子的數量以及空氣循環情況。
另一種干燥板子的方法是在室溫下干燥,但zui終的保存時間(也跟抗體有關)會比在溫箱中干燥的保存時間短,室溫下干燥后,板子可以保存在冰箱中待用。
保存:
將密封好的板子裝入袋子中在干燥環境中保存(如果需要,可以加入干燥劑),2 – 8°C可以保存1-3年。或者另一種保存方法就是板子不放入袋子中,直接保存在冰箱里。這樣板子的保質期會減少至幾個月。我們推薦用合適的具有粘性的薄膜(如封口膜)封住板子,這樣保存時空氣中濕度和污染的影響就會減小。這種方法簡單實用,并且可以經常應用于準備實驗室的板子。
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